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    組氨酸的測定方法

    發(fā)布時(shí)間: 2022-01-14  點(diǎn)擊次數(shù): 753次
       組氨酸是一種α-氨基酸,化學(xué)式為C6H9N3O2,分子量為155。組氨酸在1896年由德國物理學(xué)家艾布瑞契·科塞爾首次分離出來。在營養(yǎng)學(xué)的范疇里,組氨酸被認(rèn)為是一種人類必需氨基酸,主要是對(duì)兒童。在成年之后,人類開始可以自己合成組氨酸。在慢性尿毒癥患者的膳食中添加少量的組氨酸,氨基酸結(jié)合進(jìn)入血紅蛋白的速度增加,腎原性貧血減輕,所以組氨酸也是尿毒癥患者的必需氨基酸。在組氨酸脫羧酶的作用下,組氨酸脫羧形成組胺。組胺具有很強(qiáng)的血管舒張作用,并與多種變態(tài)反應(yīng)及炎癥有關(guān)。此外,組胺會(huì)刺激胃蛋白酶與胃酸。
      方法名稱:組氨酸的測定—電位滴定法。
      應(yīng)用范圍:本方法采用滴定法測定組胺酸的含量。
      本方法適用于組胺酸。
      方法原理:供試品加無水甲酸溶解,再加冰醋酸,照電位滴定法,用高氯酸滴定液滴定。讀出高氯酸滴定液使用量,計(jì)算組胺酸的量。
      試劑:
      1.水(新沸放置至室溫)
      2.高氯酸滴定液(0.1mol/L)
      3.無水甲酸
      4.冰醋酸
      5.醋酐
      6.結(jié)晶紫指示液
      7.基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀
      儀器設(shè)備:
      試樣制備:1.高氯酸滴定液(0.1mol/L)
      配制:取無水冰醋酸(按含水量計(jì)算,每1g水加醋酐5.22mL)750mL,加入高氯酸(70%-72%)8.5mL,搖勻,在室溫下緩緩滴加醋酐23mL,邊加邊搖,加完后再振搖均勻,放冷,加無水冰醋酸適量使成1000mL,搖勻,放置24小時(shí)。若所測供試品易乙酰化,則須用水份測定法測定本頁的含水量,再用水和醋酐調(diào)節(jié)至本液的含水量為0.01%-0.2%。
      標(biāo)定:取在105℃干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g,精密稱定,加無水冰醋酸20mL使溶解,加結(jié)晶紫指示液1滴,用本液緩緩滴定至藍(lán)色,并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,算出本液的濃度,即可。
      貯藏:置棕色玻璃瓶中,密閉保存。
      2.結(jié)晶紫指示液
      取結(jié)晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解,即得。
      操作步驟:精密稱取供試品0.15g,加無水甲酸1002mL使溶解,加冰醋酸50mL,照電位滴定法用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。記錄消耗氫氧化鈉滴定液的體積數(shù)(mL),每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于15.52mg的組胺酸(C6H9N3O2)。
      注1:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一,“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。